generalitate
Electroforeza este o tehnică utilizată în analiza de laborator care exploatează masa moleculară și sarcina electrică a proteinelor, pentru a evalua cantitatea și calitatea acestora . În special, acest test permite separarea proteinelor în cinci fracțiuni : albumină, globulele alfa 1, globulele alfa 2, globuline beta și globulele gamma . Modificarea relației dintre aceste tipuri de proteine indică unele condiții patologice. Electroforeza poate fi efectuată pe probe serice de sânge, urină sau alte fluide biologice, cum ar fi lichidul (lichidul cefalorahidian).
De asemenea, numită electroforeză proteică sau protidogramma, acest test este realizat prin adoptarea unei metode foarte speciale: un câmp electric este aplicat probei, datorită căruia proteinele "grupează" după tip. Fiecare dintre proteinele care permite analiza electroforezei are de fapt o masă moleculară proprie și o încărcătură electrică, care le permite să răspundă la stresul alimentat de curentul direct într-un mod caracteristic. În condiții normale, de exemplu, primul vârf așteptat - mai mare și mai îngust - în calea electroforetică corespunde albuminei .
În termeni mai practici, electroforeza este o analiză utilizată pentru a determina:
- Prezența proteinelor anormale;
- Absența proteinelor normale;
- Dacă un grup de proteine este prezent în mai mică sau mai mare decât în mod normal.
Electroforeza poate fi solicitată de către medic ca parte a testelor de control (analiză de rutină) sau a procedurii de diagnosticare, adică dacă alte analize de laborator au arătat modificări și este necesară aprofundarea sau confirmarea unei suspiciuni clinice.
ce
Electroforeza este o analiză de laborator care furnizează informații importante despre cantitatea de proteine prezente în serul de sânge sau alte probe biologice și, pentru fiecare fracție, arată dacă există anomalii ale calității. Acest lucru este posibil prin aplicarea unui câmp electric, exploatând mobilitatea electrophoretică a proteinelor; migrarea acestor macromolecule este influențată de masa, mărimea, încărcătura și forma lor.
În special, testul permite separarea proteinelor în cinci grupe : albumină, globule alfa 1, alfa 2, beta și gamma .
Rezultatul electroforezei permite examinarea concentrației acestor parametri: se poate observa posibila modificare a relației dintre aceste grupuri de proteine în timpul unor stări patologice. Prin urmare, electroforeza este utilă în confirmarea diagnosticului și, după stabilirea bolii, urmărirea pacientului în timpul monitorizării .
Electroforeza: pe care se pot efectua probe?
Probele biologice la care se poate aplica electroforeza sunt în principal:
- Serul : electroforeza seroproteinei sau electroforeza proteinelor serice;
- Urina : electroforeza urinară sau electroforeza proteinelor urinare;
- Lichidul (lichidul cefalorahidian) : electroforeza proteinelor lichide (nota: lichidul este lichidul care pătrunde și protejează creierul, măduva spinării, nervii cranieni și rădăcinile spinării).
Electroforeza: ceea ce este măsurat
Proteinele plasmatice sunt indicatori foarte importanți: modificările posibile ale concentrațiilor lor pot semnala prezența a numeroase boli.
Cu ajutorul electroforezei este posibilă separarea următoarelor proteine în eșantion:
- Albumin ;
- Globulele alfa 1 ;
- Globulinele alfa 2 ;
- Beta globuline ;
- Gama globulină .
În prezent, multe laboratoare efectuează o separare pe 6 benzi, adică separarea beta globulinelor în două fracțiuni:
- Beta 1 globulină ;
- Beta 2 globulinelor .
Știai că ...
În laborator, electroforeza este una dintre cele mai utilizate tehnici de analiză a compoziției calitative și cantitative a proteinelor. Această metodă de separare se bazează pe viteza de migrare diferită a particulelor încărcate electric, printr-o soluție și un mediu de susținere, sub influența unui câmp electric .
Albuminul este cea mai abundentă proteină din ser, precum și una dintre cele mai importante din organism. Acest lucru este sintetizat de ficat și este conținut în principal în fluide interstițiale și plasmă, unde reprezintă, în sine, aproximativ jumătate din proteinele circulante. Albuminul are mai multe funcții, inclusiv gestionarea corectă a presiunii osmotice și transportul de substanțe, cum ar fi bilirubina.
Globulele alfa 1 și 2 efectuează, în principal, o funcție de transport a lipidelor, a grăsimilor din sânge și a hormonilor. Beta globulinele conțin, de asemenea, substanțe în sânge; printre cele mai cunoscute proteine din acest grup sunt transferina (numită pentru transportul fierului) și beta-2 microglobulină. Globulinele gamma, pe de altă parte, au în principal o funcție de anticorpi.
Unele proteine plasmatice sunt produse de ficat (cum ar fi albumina), în timp ce altele sunt eliberate în sânge de celulele aparținând sistemului imunitar (gamaglobuline).
Mai mult: Proteine plasmatice - Funcții și caracteristici »Electroforeza: principiu de bază
Cuvânt înainte : în general, electroforeza este o metodă de separare bazată pe viteza de migrare diferită a particulelor încărcate electric, printr-o soluție și un suport poros și inert (cum ar fi hârtia, gelul de agaroză sau foaia de acetat de celuloză) sub impulsul unui câmp electric. Multe molecule de interes biologic (aminoacizi, peptide, proteine, ADN și ARN) au structuri ionizabile în structura lor, prin urmare, la o valoare corespunzătoare a pH-ului, acestea sunt prezente în soluție ca specie încărcată electric. Sub influența unui câmp electric, aceste molecule încărcate migrează la catod sau anod, în funcție de faptul dacă au o încărcătură pozitivă ( cationică ) sau negativă ( anionică ).
Electroforeza este o metodă care permite separarea macromoleculelor și, în special, a proteinelor în funcție de:
- Masa moleculară ;
- Acumulator electric .
Când sunt plasați într-un mediu de bază, proteinele se comportă ca acizi: grupul COOH al diverșilor aminoacizi care alcătuiesc structura macromoleculei, disociază în COO- (particula negativă) și H + (ion pozitiv). Proteinele sunt încărcate, prin urmare, într-o ansamblu negativă, iar mobilitatea lor electroforetică merge de la polul negativ (catod) la polul pozitiv, adică spre anod (deoarece încărcăturile negative depășesc cele pozitive).
Revenind la examinare, eșantionul pacientului - care conține un amestec de proteine (de exemplu, proteine serice) - este plasat pe o bandă electroforetică, adică suport pentru migrare .
Separarea în cinci benzi este obținută prin aplicarea unui câmp electric, generat de un curent direct, care permite diferitelor fracțiuni de proteine să migreze în funcție de masa și încărcătura lor electrică.
Rezultatul - denumit ELECTROPHORETIC TRACCIATO - constă în diferite vârfuri și curbe, la care fracțiunile proteinelor, împărțite după tip și cantitate, sunt prezente în lichidul în cauză:
- În mod normal, primul vârf, mai înalt și mai îngust, este cel al lui ALBUMINA ;
- În continuare, se observă vârfuri GLOBULINE, mult mai scăzute decât albumina.
Creșterea sau scăderea amplitudinii și intensității vârfurilor formate în cale indică o prezență mai mare sau mai mică a proteinelor din fiecare categorie.
Știai că ...
Transthyretinul în trecut a fost numit prealbumină datorită unei mobilități mai mari a electroforezei comparativ cu albumina, care îi permite să migreze într-o poziție mai anodică.
Pentru a afla mai multe: Prealbumin - Ce este »De ce da
Pentru ce este pentru electroforeză?
Electroforeza este utilizată pentru a diagnostica sau a monitoriza bolile care au printre rezultatele clinice o modificare a concentrațiilor de proteine în plasmă, urină sau alte probe biologice.
Această anomalie poate fi găsită, de exemplu, în cazul:
- Boli ale ficatului și rinichilor ;
- Infecții sau inflamații ;
- Mielom multiplu ;
- Scleroza multiplă .
Electroforeza: cand este prescris examenul?
INTRODUCERE : Determinarea proteinelor totale în sânge - proteinemie - și albumină - albuminemia - este de obicei inclusă în panourile de control, deci este frecvent utilizată în evaluarea stării de sănătate a unei persoane . În analizele de rutină, modificarea acestor parametri poate fi considerată un ALARM BELL și poate induce aprofundarea imaginii clinice, în special dacă pacientul prezintă o simptomatologie particulară.
Electroforeza proteinelor din ser se poate prescrie:
- În cazul în care alte teste de laborator furnizează un rezultat anormal, în ceea ce privește absența sau cantități mai mici și mai mari de proteine din plasmă decât în mod normal;
- Atunci când se suspectează prezența:
- Inflamația în curs de desfășurare;
- Infectarea;
- Boala autoimună;
- nefropatie;
- boli de ficat;
- Boli caracterizate prin producerea unei componente monoclonale, adică anticorpi cu aceeași structură chimică, cum ar fi:
- Mielom multiplu și variantele sale;
- Waldenström macroglobulinemia;
- Amiloidoza.
Atunci când o concentrație mare de proteine este prezentă în urină, pe de altă parte, medicul poate solicita efectuarea electroforezei proteinelor URINE . Examinarea permite determinarea sursei modificării, confirmarea sau susținerea diagnosticului.
Electroforeza produselor PROTEINS OF LIQUOR poate fi prescrisă atunci când se suspectează diagnosticul de scleroză multiplă . În acest caz, modelul electroforetic care este determinat este caracteristic, deoarece evidențiază prezența așa-numitelor benzi oligoclonale, care nu sunt în mod normal prezente în electroforeza seroforală.
Odată ce boala este diagnosticată, electroforeza poate fi efectuată la intervale regulate la:
- Monitorizați boala în timp, apoi urmați cursul (urmărirea);
- Verificați eficacitatea protocolului terapeutic .
Valori normale
La un adult sănătos, concentrația normală a proteinelor totale din sânge este de 6, 4-8, 3 grame pe deciliter de plasmă (g / dl).
Albumin (electroforeza sieroproteică)
Albuminul reprezintă 59-69% din proteinele plasmatice totale.
- Valoarea de referință Albumin: 3, 6-4, 9 g / dl
Globulele alfa 1
Globulele alfa-1 constituie 2, 0-3, 5% din proteinele plasmatice totale.
- Valoarea de referință Globulele alfa 1 : 0, 2-0, 4 g / dl
Globulele alfa 2
Globulinele alfa-2 reprezintă 6-11% din proteinele plasmatice totale.
- Valoarea de referință Globulele alfa 2 : 0, 4-0, 8 g / dl
Beta globulinelor
Beta globulinele reprezintă 6-12% din proteinele plasmatice totale.
- Valoare de referință Beta globuline: 0, 6-1 g / dl
Gama globulină
Gama globulinelor reprezintă 9-20% din proteinele plasmatice totale.
- Valoare de referință Gamma globuline : 0, 9-1, 4 g / dl
Notă : intervalul de referință al examinării poate varia ușor în funcție de vârstă, sex și instrumentație utilizat în laboratorul de analiză. Din acest motiv, este preferabil să consultați intervalele raportate direct pe raport. De asemenea, trebuie reținut faptul că rezultatele analizelor trebuie evaluate în ansamblu de medicul general care cunoaște imaginea anamnestică a pacientului.
Valori mari - cauze
Electroforeza serică: ce cauzează creșterea valorilor?
albumină
Comparația cu electroforeza unei creșteri a albuminei serice este frecventă în timpul stărilor morbide care elimină apa din corp și duc la apariția deshidratării, incluzând:
- Vărsături persistente și diaree;
- Arsuri prelungite;
- Transpirație excesivă;
- Boala lui Addison;
- Diabetul comă.
În calea electroforetică, o concentrație mai mare de albumină poate indica:
- Sarcoidoza (boala inflamatorie sistemica);
- Boala lui Buerger sau tromboangioita obliterantă (patologia care afectează vasele sanguine și arterele).
ALFA 1 GLOBULINE
Globulele alfa 1 sunt crescute în următoarele cazuri:
- Procesul inflamator sau infecția în curs de desfășurare;
- Infarctul cardiac;
- Folosirea contraceptivei contraceptive;
- Sarcina.
ALFA 2 GLOBULINE
Valorile ridicate ale globulinelor alfa 2 pot semnala prezența:
- Boală de rinichi;
- Inflamația sau infecția în curs de desfășurare;
- Infarctul cardiac;
- Diabetul;
- Sindromul Down;
- Unele tumori maligne.
BETA GLOBULINE
Creșterea globulinei beta în calea electroforetică indică:
- Colesterol în sânge (hipercolesterolemie);
- Anemie de deficit de fier;
- Unele cazuri de mielom multiplu;
- Sarcina.
GLOBULINE RANGE
În electroforeză, creșterea numărului de globuline policlonale poate fi asociată cu:
- Boli inflamatorii cronice;
- Unele boli ale sistemului imunitar;
- Poliartrita reumatoidă;
- Lupus eritematos sistemic;
- Boli cronice ale ficatului (cum ar fi hepatita și ciroza);
- Infecții acute și cronice.
Valorile gamma globulinelor monoclonale ridicate pot indica, în schimb, prezența:
- Unele tumori;
- Mielom multiplu;
- limfom;
- Macroglobulinemia lui Waldenström.
Pentru a identifica ce gama globulină este prezentă în banda monoclonală într-un model electroforetic, este posibil să se procedeze cu o imunofixare.
Electroforeza în urină
O creștere semnificativă a electroforezei proteinelor urinare poate indica o funcționare defectuoasă a glomerulilor și a tubulilor renale .
Electroforeza lichidului
Dacă electroforeza are ca rezultat proteine care nu sunt prezente în mod normal în lichidul cefalorahidian sau acestea sunt crescute, pot exista inflamații, infecții sau alte boli care afectează sistemul nervos .
Descoperirea benzilor oligoclonale în modelul electroforetic indică scleroza multiplă .
Valori mici - cauze
Electroforeza serică: ce cauzează reducerea proteinei?
albumină
O reducere a albuminei în modelul electroforetic poate fi cauzată de toate acele condiții caracterizate prin:
- Malnutriție (în special: deficiențe de proteine datorate consumului redus de dietă);
- Malabsorbție secundară la: enteropatie, boala celiacă, boala Crohn, intoleranță la proteine;
- Creșterea catabolismului : inflamație severă, stări febrile, cașexie, neoplasme, hipertiroidism, hipercortizolism etc.
Picurile de albumină scad, de asemenea, ca urmare a bolilor care afectează ficatul (capacitatea de a sintetiza) și a rinichiului (crește eliminarea).
Concentrația de albumină constatată cu electroforeza serică poate să scadă, în special atunci când acestea sunt stabilite:
- Ciroză hepatică (este cea mai frecventă cauză);
- Hepatită acută și cronică;
- Anomalii genetice (sinteza albuminelor defecte);
- Boala renală (în special sindromul nefrotic și glomerulonefrita).
Constatarea unei albumine scăzute cu electroforeză este de asemenea observată în timpul sarcinii pentru:
- Modificări hormonale care modifică permeabilitatea vasculară și funcționalitatea numeroaselor organe ale femeii însărcinate;
- Utilizarea sporită a proteinelor de către făt.
ALFA 1 GLOBULINE
Globulele alfa 1 sunt reduse la electroforeză în prezența:
- Boli hepatice grave;
- Emfizemul inborn;
- Afecțiuni renale.
ALFA 2 GLOBULINE
Valorile scăzute ale globulinelor alfa 2 pot indica:
- subnutriție;
- Boli hepatice grave;
- Hemoliza.
BETA GLOBULINE
O concentrație redusă de globuline beta în calea de electroforeză poate semnala:
- subnutriție;
- Ciroza hepatică.
GLOBULINE RANGE
Valorile reduse ale globulelor gama pot indica prezența diferitelor boli ale sistemului imunitar.
Electroforeza în urină
În mod normal, cu electroforeza, se constată o mică concentrație de proteine în urină. Prin urmare, acest rezultat nu indică prezența anumitor boli.
Electroforeza lichidului
În condiții normale, concentrația proteinelor totale din lichior este foarte scăzută. Comparația valorilor reduse la electroforeză nu se corelează, așadar, cu o semnificație patologică particulară.
Cum se efectuează
Electroforeza: din ce constă examenul
- Electrophoresa seroproteică (test de sânge) : pentru a obține urme electroforetice pe ser, este necesar să se efectueze o simplă eșantionare de sânge din venă a unui braț. Ulterior, zerul se obține prin separarea fracțiunii care conține celulele de cea lichidă.
- Protecția electroteziei urinare (analiza urinei) : este necesar să se colecteze o cantitate mică de urină într-un recipient steril special. Conform indicațiilor medicului și laboratorului, proba poate fi colectată fără un timp exact ( aleatoriu ) sau în decurs de 24 de ore .
- Electroforeza pe bază de lichide (analiza lichidului cefalorahidian) : necesită retragerea unei mici cantități de lichid, prin introducerea unui ac, în cavitatea spinală ( puncție lombară ).
preparare
Electroforeza: este un preparat necesar?
- Înainte de prelevarea de probe de sânge, unele laboratoare pot necesita un postaj de cel puțin 10-12 ore. În această perioadă de timp este permis să se ia o cantitate mică de apă.
- Electroforeza poate fi efectuată pe urină colectată la o anumită oră a zilei (aleatorie) sau în decurs de 24 de ore, deci este necesar să se obțină în avans containerele sterile adecvate.
- Cu toate acestea, în ceea ce privește electroforeza lichidelor, nu este necesară nicio pregătire specială.
Ce poate modifica rezultatul examenului?
Unele medicamente pot afecta rezultatul electroforezei, prin urmare este indicat să se raporteze medicului orice tratament în curs. De exemplu, medicamentele care pot modifica descoperirea clinică includ contraceptive orale, steroizi anabolizanți, androgeni, hormoni de creștere, insulină și antibiotice.
Alți factori care pot influența examenul includ:
- Hyperlipidemia (prezența multor grăsimi în sânge);
- Administrarea unor cantități mari de fluide intravenoase;
- Dieta vegetariana;
- Probele hemolizate (dacă se efectuează electroforeză pe ser).
Interpretarea rezultatelor
Modelul de electroforeză este evaluat în combinație cu rezultatul altor analize și oferă informații despre starea de sănătate a pacientului.
Scăderea sau creșterea proteinelor în electroforeză serică, urină sau lichior arată prezența diferitelor boli, identificate în funcție de parametrul afectat de modificare.
Trebuie să ne amintim întotdeauna că valorile de referință se pot schimba de la un laborator la altul. Prin urmare, este esențial să consultați medicul de îngrijire medicală primară sau un specialist referitor la citirea și interpretarea rezultatelor.
