Pentru a menține un echilibru adecvat între radicalii liberi și sistemele antioxidante, este important să oferim corpului o cantitate adecvată de molecule cu proprietăți antioxidante din exterior, pentru a evita ca epuizarea naturală împotriva radicalilor, constând din bariera antioxidantă, să fie epuizată. lăsând biomoleculele expuse la agresiunea speciilor reactive care le compromite funcționalitatea.
Moleculele antioxidante, care pot fi luate cu dieta prin consumul de alimente bogate în aceste substanțe sau prin suplimente vizate, sunt numeroase și includ polifenoli, vitamine, carotenoide și multe alte substanțe. Acești compuși sunt capabili să reacționeze cu radicalii liberi, reducând reactivitatea lor și generând molecule mai puțin periculoase ușor de eliminat din organism.
De asemenea, este important să se țină cont de faptul că antioxidanții acționează cu mecanisme diferite și cu eficiență diferită, în funcție de tipul radicalului implicat în reacție. Fiecare antioxidant, de fapt, este capabil să-și desfășoare acțiunea de contrast pe câțiva radicali specifici, deci este necesar ca contribuția antioxidanților exogeni să fie cât mai variată posibil, astfel încât diferitele molecule să poată acționa într-un mod complementar sau în sinergie în protejarea biomoleculelor de oxidare prin specii radicale de natură diferită.
În acest sens, atenția cercetării sa axat pe aprofundarea mecanismelor cu care antioxidanții protejează celulele. În special, este foarte important să se măsoare cantitatea de antioxidanți introdusă cu dieta sau eficacitatea barierului antioxidant, astfel încât să poată corecta orice situație de risc într-un mod vizat.
Principala dificultate în măsurarea eficacității antioxidante a unei substanțe se datorează faptului că speciile de radicali liberi implicați în determinarea stresului oxidativ sunt numeroase și reacționează cu biomoleculele cu viteze și mecanisme diferite. Datorită naturii diferite a radicalilor liberi, este extrem de dificil să se identifice o metodă de analiză care să permită măsurarea într-un mod univoc a capacității unui compus de a contracara acțiunea oxidantă a speciilor reactive, în special atunci când se ocupă de matrice complexe, cum ar fi sânge, alimente sau extracte de plante. Radicalii liberi, de fapt, diferă în reactivitate, pentru tipul de biomolecule țintă, pentru matricea biologică în care acționează și pentru afinitatea fizico-chimică (mediul lipofil sau hidrofil), precum și pentru mecanismul cu care sunt generate.
În plus, pentru a compara datele măsurate pentru diferite substanțe, este important să încercați să standardizați metodele utilizate cât mai mult posibil. O metodă analitică ideală ar trebui mai întâi să fie simplă și ușor reproductibilă, pentru a garanta o repetabilitate bună a rezultatelor. În plus, ar trebui să utilizeze radicali semnificativi biologic, care reacționează cu mecanisme clare și cunoscute, pentru a simula cât mai mult posibil in vitro ceea ce se întâmplă în organism, minimizând interferențele. În cele din urmă, un test ideal ar trebui să fie versatil pentru a permite măsurarea substanțelor atât hidrofile, cât și lipofile.
În prezent, nu există o singură metodă valabilă pentru măsurarea puterii antioxidante a unui compus, care să răspundă la caracteristicile descrise. Prin urmare, este necesar să se recurgă la combinarea rezultatelor mai multor eseuri bazate pe mecanisme și diferite specii radicale, astfel încât să se ajungă la un compromis care ia în considerare și utilizarea finală a rezultatelor înseși.
Stabiliți ceea ce doriți să măsurați și de ce este important nu numai alegerea celor mai potrivite metode de măsurare, dar și folosirea celui mai potrivit protocol de extracție, deoarece antioxidanții reprezintă o familie foarte mare de compuși cu caracteristici chimico-fizice foarte diferite și nu există o tehnică extractivă capabilă să extragă toți antioxidanții prezenți într-o matrice complexă, minimizând în același timp prezența unor potențiali interferenți care pot distorsiona rezultatele.
METODE ANALITICE
Modul cel mai direct de a evalua capacitatea unui compus de a proteja celulele și țesuturile de stresul oxidativ este măsurarea capacității antioxidante a sângelui după administrarea aceluiași compus, adică eficacitatea consolidării barierului antioxidant, care include toate substanțe antioxidante prezente în sânge. Testele elaborate au în general caracteristici foarte specifice și sunt capabile să măsoare acțiunea unui anumit tip de antioxidant în condiții bine definite. Cu toate acestea, diferiți antioxidanți prezenți în sânge nu acționează separat, ci efectuează o acțiune strict interconectată pentru a crea o sinergie care să permită o protecție optimă împotriva agresiunii de către radicalii liberi. Prin urmare, măsura adevărată a capacității totale antioxidante nu poate fi redusă la simpla sumă a capacității antioxidante a componentelor individuale și este imposibil să se determine acțiunea globală a sistemelor antioxidante în fluide biologice printr-un singur test.
O modalitate alternativă este măsurarea in vitro a puterii antioxidante a substanțelor exogene care sunt luate cu dieta (alimente și suplimente). În acest caz, totuși, trebuie remarcat faptul că aceasta este o măsură a potențialului antioxidant al unui compus, care oferă doar o aproximare a capacității sale de a exercita o acțiune protectoare reală în compartimentele biologice împotriva agresiunii radicalilor liberi, deoarece ea evaluează în mod cantitativ, antioxidanții prezenți, dar nu oferă nicio informație privind biodisponibilitatea și eficiența lor atunci când sunt introduși în organism.
Metodele de măsurare a capacității antioxidante pot fi împărțite în două categorii pe baza mecanismului prin care aceștia reacționează cu radicalii liberi pentru a-și inactiviza reactivitatea:
- Metodele HAT (Transfer de atomi de hidrogen), care se bazează pe capacitatea unei substanțe de a-și exercita acțiunea antioxidantă prin eliberarea unui atom de hidrogen la speciile radicale;
- SET (Metoda Single Transfer Electron), care evaluează capacitatea unei substanțe de a reduce radicalii liberi prin transferul de electroni.
Unele dintre metodele analitice folosite sunt capabile să acționeze cu ambele mecanisme.
Pe baza a ceea ce sa spus până acum, este clar că numărul de teste dezvoltate pentru determinarea capacității antioxidante și antiradicale este foarte mare, așa că vom descrie pe scurt cele mai răspândite și mai semnificative, încercând să evidențiem punctele sale forte și limitele. .
